Положителна реакция на Coombs. Каква е целта на теста на Coombs? Откриване на "термични" антитела

На повърхността на еритроцитите е голям бройантигени. В зависимост от вида на тези антигени се разграничават кръвни групи, като най-изследваните групи са ABO, Rh, Kell, Duffy и много други.

Средна цена във вашия район: 2645 от 2645 ... до 2645

1 лаборатории извършват този анализ във вашия район

Описание на изследването

Подготовка за изследването:Взема се кръв от вена и след това се получава серум (кръвна плазма без фибриноген) чрез естествена коагулация или чрез утаяване на фибриноген. Проучван материал:Вземане на кръв

На повърхността на еритроцитите има голям брой антигени. В зависимост от вида на тези антигени се разграничават кръвни групи, най-изследваните групи са ABO, Rh, Kell, Duffy и много други системи. Обикновено в кръвта има антитела срещу антигени от друга група, но по време на кръвопреливане, бременност, автоимунни заболяванияи други се откриват антитела към техните антигени.Непълни антитела към еритроцитите

Метод

Индиректната реакция на Coombs се основава на откриването на аглутинация (слепване) на еритроцити, които имат непълни антитела на повърхността, което се появява при добавяне на антиглобулинов серум.

На първия етап в една епруветка се добавят донорни еритроцити (O(I) група, Rh+) ​​и тестовият серум. Ако в тестовия серум присъстват непълни антитела срещу еритроцитите, те се фиксират върху повърхността на донорните еритроцити.

На втория етап върху стъклото се прилагат донорни еритроцити с антитела (ако има такива) и стандартен антиглобулинов серум с антитела срещу човешки имуноглобулини. Ако на първия етап антителата срещу еритроцитите се фиксират върху повърхността на еритроцитите, тогава при добавяне на стандартен серум еритроцитите се слепват поради взаимодействието на антителата.

Референтни стойности - норма
(Непряка реакция на Кумбс (антиглобулинов тест, откриване на непълни антиеритроцитни антитела), кръв)

Информацията относно референтните стойности на показателите, както и самият състав на показателите, включени в анализа, може леко да се различават в зависимост от лабораторията!

норма:

Обикновено не трябва да има антитела към собствените еритроцити, при определяне на реакцията на Кумбс не се наблюдава агрегация на еритроцитите.

Показания

Изследване на хуморален специфичен имунитет при съмнение за автоимунни реакции в организма, Rh-конфликт между майката и плода, определяне на съвместимостта на кръвта на донора и реципиента

Увеличаване на стойностите (положителен резултат)

Антитела срещу еритроцитите се откриват, когато:

1. Автоимунна хемолитична анемия

2. Хемолитична болест на новороденото

3. Системни заболявания на съединителната тъкан

4. Хроничен активен хепатит и др.

Антителаразположени на повърхността на еритроцитите, могат да бъдат както в статично, така и в свободно състояние в кръвна плазма. В зависимост от състоянието на антителата се извършва директна или индиректна реакция на Кумбс. Ако има причина да се смята, че антителата са фиксирани на повърхността на червените кръвни клетки, се извършва директен тест на Coombs. В този случай тестът преминава на един етап - добавя се антиглобулинов серум. Ако на повърхността на червените кръвни клетки има непълни антитела, аглутинацияеритроцити.

Непряка реакция

Индиректната реакция на Кумбс протича в 2 стъпки. Първо, необходимо е изкуствено прилагане сенсибилизацияеритроцити. За да направите това, еритроцитите и изследваният кръвен серум се инкубират, което води до фиксиране на антитела върху повърхността на еритроцитите. След това се извършва вторият етап от теста на Coombs - добавяне на антиглобулинов серум.

реакция на утаяване - RP (от лат. praecipilo до утаяване) е образуването и утаяването на комплекс от разтворим молекулен антиген с антитела под формата на мътност, т.нар. утайка. Образува се чрез смесване на антигени и антитела в еквивалентни количества, излишъкът на едно от тях намалява нивото на образуване на имунния комплекс. Реакцията на утаяване се поставя в епруветки (реакция на пръстеновидно утаяване), в гелове, хранителни среди и др. Разновидностите на реакцията на утаяване в полутечен гел от агар или агароза са широко използвани, двойна имунодифузия според Ouchterlony, радиева имунодифузия, имуноелектрофорезаи т.н.

HLA типизиране- изследване на основния човешки комплекс за хистосъвместимост - HLA комплекс. Тази формация включва област от гени на хромозома 6, които кодират HLA антигени, участващи в различни имунни отговори.

Задачи при HLA типизиранемогат да бъдат много различни - биологична идентификация (HLA-типът се наследява заедно с родителските гени), определяне на предразположеността към различни заболявания, избор на донори за трансплантация на органи - в този случай се сравняват резултатите от HLA типизирането на донорни и реципиентни тъкани. С помощта на HLA типизирането се установява колко сходни или различни са съпрузите по отношение на антигените на тъканната съвместимост, за да се диагностицират случаите на безплодие.

HLA типизиране предполага Анализ на HLA полиморфизъми се осъществява по два метода - серологичен и молекулярно-генетичен. Класическият серологичен метод за HLA типизиране се основава на микролимфоцитотоксичен тест, докато молекулярният метод използва PCR (полимеразна верижна реакция).

Серологични HLA типизиранеизвършва се върху изолирани клетъчни популации. Антигените на основния комплекс на хистосъвместимост се пренасят главно от лимфоцити. Следователно суспензия от Т-лимфоцити се използва като основни носители на антигени от клас I и суспензия от В-лимфоцити за определяне на антигени от HLA клас II. За изолиране на желаните клетъчни популации от цяла кръв се използва или центрофугиране, или имуномагнитно разделяне. Смята се, че първият метод може да доведе до фалшиво положителни данни, тъй като в този случай някои от клетките умират. Вторият метод е признат за по-специфичен - докато повече от 95% от клетките остават жизнеспособни.

Но основата за поставяне на лимфоцитотоксичен тест HLA типизиранее специфичен серум, съдържащ антитела към различни алелни варианти на HLA антигени I и II клас. Серологичният тест ви позволява да определите типа HLA, като изследвате кой от серумите реагира с лимфоцитите и кой не.

Ако възникне реакция между клетките и серума, на повърхността на клетката се образува комплекс антиген-антитяло. След добавяне на разтвор, съдържащ комплемент, настъпва лизис и клетъчна смърт. Серологичният тест за HLA типизиране се оценява с помощта на флуоресцентна микроскопия за оценка на положителните (червена флуоресценция) и отрицателните (зелена флуоресценция) реакции или фазово-контрастна микроскопия за оцветяване на ядрата на мъртвите клетки. Резултатът от HLA типизирането се получава, като се вземат предвид спецификата на реагиралите серуми и кръстосано реагиращите групи от антигени, интензивността на реакцията на цитотоксичност.

Недостатъците на серологичните HLA типизиранеса наличие на кръстосани реакции, слаб афинитет на антитела или ниска експресия на HLA антигени, липса на протеинови продукти в редица HLA гени.

По-модерни, молекулярни методи HLA типизиранеизползват се вече стандартизирани синтетични проби, които не реагират с антигени на повърхността на левкоцитите, а с ДНК и директно показват какви антигени има в пробата. Молекулярните методи не изискват живи левкоцити, може да се изследва всяка човешка клетка и няколко микролитра кръв са достатъчни за работа или може да се ограничи до изстъргване от устната лигавица.

Молекулярна генетика HLA типизиранеизползва метода PCR, чиято първа стъпка е получаването на чиста геномна ДНК (от цяла кръв, левкоцитна суспензия, тъкани).

След това ДНК пробата се копира - амплифицира в епруветка с помощта на праймери (къса едноверижна ДНК), специфични за специфичен HLA локус. Краищата на всяка двойка праймери трябва да са стриктно комплементарни на уникална последователност, съответстваща на конкретен алел, в противен случай не се получава амплификация.

След PCR при многократно копиране се получават голям брой ДНК фрагменти, които могат да бъдат оценени визуално. За да направите това, реакционните смеси се подлагат на електролиза или хибридизация и се определя дали е настъпило конкретно усилване с помощта на програма или таблица. Резултатът от HLA типизирането се представя под формата на изчерпателен доклад на генно и алелно ниво. Поради стандартизацията на използваните проби, молекулярната HLA типизиранепо-точно серологично. В допълнение, той предоставя повече информация (повече нови ДНК алели) и по-високо ниво на детайлност, тъй като ви позволява да идентифицирате не само антигени, но и самите алели, които определят кой антиген присъства в клетката.

реакция на имунен лизис.Реакцията се основава на способността на специфични антитела да образуват имунни комплекси с клетки, включително еритроцити, бактерии, което води до активиране на системата на комплемента по класическия път и клетъчен лизис. От реакциите на имунния лизис най-често се използва реакцията на хемолиза и рядко реакцията на бактериолиза (главно при диференциация на холера и холероподобни вибриони).

реакция на хемолиза.Под въздействието на реакцията с антитела в присъствието на комплемент, мътната суспензия на еритроцитите се превръща в яркочервена прозрачна течност - „лакова кръв“ поради освобождаването на хемоглобин. При установяване на диагностична реакция на фиксиране на комплемента (RCC), реакцията на хемолиза се използва като индикатор: за тестване на наличието или отсъствието (свързване) на свободен комплемент.

Реакция на локална хемолиза в гел(реакция на Jerne) е един от вариантите на реакцията на хемолиза. Тя ви позволява да определите броя на клетките, образуващи антитела. Броят на клетките, секретиращи антитела - хемолизини, се определя от броя на хемолизните плаки, които се появяват в агар гел, съдържащ еритроцити, клетъчна суспензия от изследваната лимфоидна тъкан и комплемент.

Имунофлуоресцентен метод

(RIF, имунофлуоресцентна реакция) - метод за откриване на специфични Ag (Ab) с помощта на Ab (Ag), конюгиран с флуорохром. Има висока чувствителност и специфичност. Използва се при експресни д-ки инфекции. заболявания (идентифициране на причинителя в изследователския материал), както и за определяне на антитела и повърхностни рецептори и маркери на левкоцити (иммунофенотипизиране) и други клетки. Директен I. m.се състои в обработката на тъканна секция или намазка от патологичен материал или микробен то-ри с-кой, съдържащ специфични антитела, конюгирани с флуорохром; лекарството се промива за отстраняване на несвързаните антитела и се изследва под флуоресцентен микроскоп. В положителни случаи светещ имунен комплекс се появява около периферията на обекта. Необходим е контрол, за да се изключи неспецифична луминесценция. При непряк. тях.на първия етап тъканен срез или намазка се третира с нефлуоресцентно специфично средство, на втория етап с луминисцентно средство срещу -глобулини на това животно, което е приложено на първия етап. При положителен случай се образува светлинен комплекс, състоящ се от Ar, Am към него и Am срещу At (сандвич метод). В допълнение към луминисцентен микроскоп, за отчитане на RIF по време на клетъчно фенотипиране, лазерен сортировач на клетки .

поточна цитометрия- метод за оптично измерване на параметрите на клетката, нейните органели и процесите, протичащи в нея.

Техниката се състои в откриване на разсейване на светлината от лазерен лъч, когато клетката преминава през него в течна струя, а степента на дисперсия на светлината позволява да се получи представа за размера и структурата на клетката. В допълнение, анализът взема предвид нивото на флуоресценция на химични съединения, които изграждат клетката (автофлуоресценция) или въведени в пробата преди поточна цитометрия.

Клетъчната суспензия, предварително маркирана с флуоресцентни моноклонални антитела или флуоресцентни багрила, влиза в течния поток, преминаващ през поточната клетка. Условията са подбрани така, че клетките да се нареждат една след друга поради т.нар. хидродинамично фокусиране на струя в струя. В момента, в който клетката пресече лазерния лъч, детекторите записват:

разсейване на светлината под малки ъгли (от 1° до 10°) ( тази характеристикаизползвани за определяне на размера на клетката).

разсейване на светлината под ъгъл от 90 ° (позволява ви да прецените съотношението ядро ​​/ цитоплазма, както и хетерогенността и грануларността на клетките).

интензитет на флуоресценция в няколко флуоресцентни канала (от 2 до 18-20) - ви позволява да определите субпопулационния състав на клетъчната суспензия и др.

- антиглобулинов тест, насочен към откриване в Rh-отрицателна кръв на непълни антиеритроцитни антитела към Rh фактора - специфичен протеин, който се намира на повърхността на еритроцитите на Rh-положителна кръв. Има два вида този тест: директен - откриване на антитела на повърхността на червените кръвни клетки, индиректен - откриване на антитела в кръвния серум. Провежда се директен тест при диагностика и проследяване на лечението на заболявания на кръвта: хемолитична анемия, хемолитична болестновородени и други. Провежда се индиректен тест за оценка на съвместимостта на кръвта на донора и реципиента по време на кръвопреливане, както и за определяне на наличието и риска от Rh конфликт при планиране и водене на бременност. Материалът за теста на Кумбс е деоксигенирана кръв, изследването се извършва по методи, базирани на реакцията на аглутинация. Обикновено и двете проби дават отрицателен резултат. Анализът се извършва в рамките на един ден.

Тест на Кумбс - клинично изпитване Rh-отрицателна кръв, насочена към откриване на антитела срещу Rh фактора. Тестът се използва за идентифициране на риска от развитие на резус конфликт и хемолитични реакции. Във всеки човек повърхността на еритроцитите съдържа определен набор от антигени или аглутиногени - съединения от различно естество, по наличието или отсъствието на които се съди за кръвната група и Rh фактора. Има много видове антигени, в медицинската практика най-голямо практическо значение имат аглутиногените А и В, които определят кръвната група, и аглутиногенът D, Rh факторът. При положителен Rh фактор D антигените се откриват върху външната мембрана на еритроцитите, с отрицателен - не.

Тестът на Coombs, който също се нарича антиглобулинов тест, е насочен към откриване на непълни антиеритроцитни антитела към Rh факторната система в кръвта. Антителата срещу Rh фактора са специфични имуноглобулини, които се произвеждат в Rh-отрицателна кръв, когато в нея попаднат еритроцити с аглутиногени D. Това може да се случи при смесване на кръвта на плода и бременната жена, като кръвопреливането се извършва без предварително определяне на кръвната група. Тестът на Кумбс съществува в два варианта - директен и индиректен. При извършване на директен тест на Coombs се откриват антитела, прикрепени към повърхността на червените кръвни клетки. Изследването се използва за определяне на причината за хемолитичната реакция. Индиректният тест на Coombs е насочен към откриване на антиеритроцитни антитела в кръвната плазма. Необходимо е да се определи съвместимостта на кръвта на донора и реципиента или майката и плода, помага да се предотврати развитието на резус конфликт и последваща хемолиза на червените кръвни клетки.

Кръвта и за двата варианта на теста на Кумбс се взема от вената. Анализът се извършва по метода на аглутинация с антиглобулинов серум. Резултатите от изследването се използват в хематологията при идентифициране на причините за хемолитичните реакции, в хирургията и реанимацията по време на кръвопреливания, в акушерството и гинекологията при проследяване на бременност при жени с Rh-отрицателна кръв.

Показания

Директният тест на Coombs, който открива антитела, прикрепени към повърхността на червените кръвни клетки, се предписва за хемолитични реакции (разрушаване на червени кръвни клетки) от различен произход. Изследването е показано при първична автоимунна хемолитична анемия, посттрансфузионна хемолитична анемия, хемолитична болест на новороденото, хемолиза на червени кръвни клетки, причинена от автоимунни, туморни или инфекциозни заболявания, както и получаване лекарстванапример хинидин, метилдопа, прокаинамид. Индиректният тест на Coombs, който открива антитела в кръвната плазма, се използва за предотвратяване на развитието на резус конфликт. Показан е за пациенти, подготвящи се за кръвопреливания, както и за бременни жени с отрицателен Rh фактор, при условие че бъдещият баща на детето има положителен Rh фактор.

За да се определи Rh съвместимостта, тестът на Coombs не се прилага при пациенти с Rh-положителна кръв. В тези случаи вече има антигени на повърхността на червените кръвни клетки, производството на антитела не може да бъде предизвикано от кръвопреливане или навлизане на фетална кръв в кръвния поток на бременната жена. Също така, изследването не е показано за бременни жени, ако и двамата родители имат отрицателен Rh фактор, наследствена рецесивна черта. Дете в такива двойки винаги има Rh-отрицателна кръв, имунологичен конфликт с майката е невъзможен. При хемолитични патологии антиглобулиновият тест не се използва за проследяване на успеха на терапията, тъй като резултатите не отразяват активността на процеса на разрушаване на еритроцитите.

Ограничението на теста на Coombs е сложността на изследователската процедура - за получаване на надеждни резултати е необходимо да се спазват температурните и времеви условия, правилата за приготвяне на реактиви и биоматериал. Предимството на теста на Coombs е неговата висока чувствителност. При хемолитична анемия резултатите от този тест остават положителни, дори ако хемоглобинът, билирубинът и ретикулоцитите се нормализират.

Подготовка за анализ и събиране на материал

Материалът за провеждане на теста на Кумбс е венозна кръв. Няма специални изисквания за времето на процедурата за вземане на кръв и за подготовката на пациента. Както при всяко изследване, препоръчително е да правите почивка след хранене поне 4 часа, а през последните 30 минути да спрете да пушите, физическа дейностизбягвайте емоционалния стрес. Също така си струва предварително да обсъдите с Вашия лекар необходимостта от спиране на приема на лекарства - някои лекарства могат да изкривят резултатите от теста на Coombs. Кръвта се взема със спринцовка от кубиталната вена, по-рядко от вената на гърба на ръката. В рамките на няколко часа материалът се доставя в лабораторията.

При извършване на директен тест на Coombs към кръвния серум на пациента се добавя антиглобулинов серум. След известно време сместа се изследва за наличие на аглутинати - те се образуват, ако има антитела върху червените кръвни клетки. При положителен резултат се определя аглутиниращ титър. Индиректният тест на Coombs се състои от повече стъпки. Първо, наличните в серума антитела се фиксират върху инжектираните еритроцити по време на инкубацията. След това към пробата се добавя антиглобулинов серум, след известно време се определя наличието и титъра на аглутинатите. Срокът за анализ е 1 ден.

Нормални резултати

Обикновено резултатът от директния тест на Coombs е отрицателен (-). Това означава, че в кръвта няма антитела, свързани с червените кръвни клетки, и те не могат да бъдат причина за хемолиза. Нормален резултатиндиректният тест на Coombs също е отрицателен (-), т.е. няма антитела срещу Rh фактора в кръвната плазма. Когато се подготвяте за кръвопреливане за реципиента, това означава съвместимост с кръвта на донора, докато наблюдавате бременността - липсата на Rh сенсибилизация на майката, нисък риск от развитие на имунологичен конфликт. Физиологичните фактори, като диетични навици или физическа активност, не могат да повлияят на резултата от теста. Ето защо, ако резултатът е положителен, е необходима консултация с лекар.

Диагностична стойност на анализа

Положителният резултат от теста на Coombs се изразява качествено, от (+) до (++++), или количествено, в титри от 1:16 до 1:256. Определянето на концентрацията на антитела върху еритроцитите и в кръвния серум се извършва и в двата вида проби. При положителен резултат от директния тест на Coombs се откриват антитела върху външната мембрана на червените кръвни клетки, което води до разрушаването на тези кръвни клетки. Причината може да бъде кръвопреливане без предварително типизиране - посттрансфузионна хемолитична реакция, както и неонатална еритробластоза, хемолитична реакция поради употреба на лекарства, първична или вторична автоимунна хемолитична анемия. Вторичното разрушаване на еритроцитите може да бъде причинено от системен лупус еритематозус, синдром на Evans, макроглобулинемия на Waldenström, пароксизмална студена хемоглобинурия, хронична лимфоцитна левкемия, лимфом, инфекциозна мононуклеоза, сифилис, микоплазмена пневмония.

Положителният резултат от индиректния тест на Coombs показва наличието на антитела срещу Rh фактора в плазмата. На практика това означава, че е настъпила Rh сенсибилизация, има възможност за развитие на Rh конфликт след вливане на донорска кръв по време на бременност. За предотвратяване на усложнения при бременност при жени с положителен резултатТестът на Coombs се поставя на специална сметка.

Лечение на отклонения от нормата

Тестът на Coombs се отнася до изосерологични изследвания. Резултатите от него позволяват да се идентифицира хемолитична реакция, както и да се определи съвместимостта на кръвта на донора и реципиента, майката и плода, за да се предотврати развитието на резус конфликт. Ако резултатът от теста е положителен, тогава е необходимо да се потърси съвет от лекуващия лекар - акушер-гинеколог, хематолог, хирург.

Реакция на аглутинация за определяне на анти-резус антитела ( индиректна реакцияКумбс)Приложипри пациенти с интраваскуларна хемолиза. При някои от тези пациенти се откриват антирезус антитела, които са непълни, едновалентни. Те специфично взаимодействат с Rh-положителните еритроцити, но не предизвикват тяхната аглутинация. Наличието на такива непълни антитела се определя в индиректната реакция на Coombs. За да направите това, към системата анти-Rh антитела + Rh-положителни еритроцити се добавя антиглобулинов серум (антитела срещу човешки имуноглобулини), което предизвиква аглутинация на еритроцитите. С помощта на реакцията на Кумбс се диагностицират патологични състояния, свързани с вътресъдов лизис на еритроцити от имунен произход, например хемолитична болест на новороденото: еритроцитите на Rh-положителен плод се комбинират с непълни антитела срещу Rh фактора, циркулиращ в кръвта, който преминава плацентата от Rh-отрицателна майка.

Механизъм. Трудността при откриването на непълни (едновалентни) антитела се дължи на факта, че тези антитела, когато се свързват с епитопи на специфичен антиген, не образуват решетъчна структура и реакцията между антигени и антитела не се открива чрез аглутинация, утаяване или други тестове. За идентифициране на образуваните комплекси антиген-антитяло е необходимо да се използват допълнителни тест системи. За откриване на непълни антитела, например към Rh антигена на еритроцитите в кръвния серум на бременна жена, реакцията се провежда на два етапа: 1) еритроцитите, съдържащи Rh антигена, се добавят към двукратни разреждания на тестовия серум и се държи при 37 ° C за един час; 2) към еритроцитите, старателно измити след първия етап, добавете заешки античовешки антиглобулинов серум (в предварително титрирано работно разреждане). След инкубация в продължение на 30 минути при 37°C, резултатите се оценяват по наличието на хемаглутинация (положителна реакция). Необходимо е да се контролират съставките на реакцията: 1) антиглобулинов серум + еритроцити, очевидно сенсибилизирани със специфични антитела; 2) еритроцити, третирани с нормален серум + антиглобулинов серум; 3) Rh-отрицателни еритроцити, третирани с тест серум + антиглобулинов серум.

50. Реакция на пасивна хемаглутинация. Механизъм. Компоненти. Приложение.

Реакцията на индиректна (пасивна) хемаглутинация(RNGA, RPGA)се основава на използването на еритроцити (или латекс) с адсорбирани на повърхността им антигени или антитела, взаимодействието на които със съответните антитела или антигени от кръвния серум на пациенти води до слепване на еритроцитите и изпадане на дъното на тръба или клетка под формата на назъбена утайка.

Компоненти.За производството на RNHA могат да се използват еритроцити от овце, коне, зайци, кокошки, мишки, хора и други, които се събират за бъдеща употреба, третирани с формалин или глутаралдехид. Адсорбционният капацитет на еритроцитите се увеличава, когато се третират с разтвори на танин или хромен хлорид.

Като антигени в RNGA могат да служат полизахаридни антигени на микроорганизми, екстракти от бактериални ваксини, антигени на вируси и рикетсии, както и други вещества.

Еритроцитите, сенсибилизирани от АГ, се наричат ​​еритроцитни диагностикуми. За приготвяне на еритроцитен диагностикум най-често се използват еритроцити от овен, които имат висока адсорбираща активност.

Приложение. RNHA се използва за диагностициране на инфекциозни заболявания, определяне на гонадотропен хормон в урината при установяване на бременност, за откриване на свръхчувствителност към лекарства, хормони и в някои други случаи.

Механизъм. Тестът за индиректна хемаглутинация (RIHA) има много по-висока чувствителност и специфичност от теста за аглутинация. Използва се за идентифициране на патогена по неговата антигенна структура или за посочване и идентифициране на бактериални продукти - токсини в изследвания патологичен материал. Съответно се използват стандартни (комерсиални) диагностикуми за еритроцитни антитела, получени чрез адсорбция на специфични антитела върху повърхността на танизирани (третирани с танин) еритроцити. Последователни разреждания на тестовия материал се приготвят в ямките на пластмасови плаки. След това равен обем от 3% суспензия от заредени с антитела еритроцити се добавя към всяка ямка. Ако е необходимо, реакцията се поставя паралелно в няколко реда ямки с еритроцити, натоварени с антитела с различна групова специфичност.

След 2 часа инкубация при 37 ° C, резултатите се вземат предвид чрез оценка на външния вид на еритроцитната утайка (без разклащане): при отрицателна реакция се появява утайка под формата на компактен диск или пръстен на дъното на ямката, с положителна реакция, характерна дантелена утайка от еритроцити, тънък филм с неравни ръбове.

Тестът на Кумбс е метод лабораторни изследваниянаправени чрез повлияване на хемаглутинацията. Основава се на чувствителността на антителата към имуноглобулини и ензимни елементи, както и способността им да аглутинират еритроцити, покрити с C3 или Lg.

Директна диагностика на Coombs

Използва се за откриване на антитела или компоненти на комплемента, монтирани от външната страна на клетките. Директният тест на Coombs се извършва по следните стъпки.

Използването на такъв тест

Директната диагноза на Coombs се използва в определени случаи, като например:

• трансфузионни ефекти;
• автоимунна хемолиза;
• лекарствено индуцирана хемолитична анемия.

Индиректен тест на Кумбс

Тази диагностика позволява да се открият антитела към клетки в серума, който обикновено се инкубира с донорни еритроцити тип 0, след което се извършва директен тест. Приложете индиректна диагностика на Coombs в следните случаи:

Как да се подготвим за анализ

Има някои правила за подготовка за проучването.

1. Ако пациентът е новородено, родителите трябва да са наясно, че изследването ще помогне за диагностицирането на ONH ( хемолитична болестновородени).
2. Ако пациентът има съмнения за хемолитична анемия, трябва да му се обясни, че анализът ще му позволи да разбере дали е причинено от защитни нарушения, лекарства или други фактори.
3. Тестът на Coombs, директен и индиректен, не прави никакви диетични или диетични ограничения.
4. Необходимо е да уведомите пациента, че ще му бъде взета кръв от вена за изследването, както и да му кажете кога точно ще бъде извършена венепункцията.
5. Трябва също да бъдете предупредени за вероятността от дискомфорт по време на периода на превръзка на ръката и самата процедура.
6. Лекарствата, които могат да повлияят на резултата от пробата, трябва да бъдат преустановени.

Тези лекарства включват:

• "Стрептомицин";
• "Метилдопа";
• "Прокаинамид";
• сулфонамиди;
• "Мелфалан";
• "Хинидин";
• "Рифампин";
• "Изониазид";
• цефалоспорини;
• "Хидралазин";
• "Хлорпромазин";
• "леводопа";
• "Тетрациклин";
• "Дифенилхидантоин";
• "Етосуксимид";
• "Пеницилин";
• мефенамова киселина.

Вземането на кръв се извършва сутрин на празен стомах.

Как се провежда събитието

Тестът на Coombs се провежда в следния ред:

1. При извършване на диагностика при възрастен пациент след венепункция се взема кръв в епруветки с EDTA (етилендиаминтетраацетат).
2. От новороденото се взема кръв от пъпната връв в чаша с EDTA.
3. Мястото на убождане се притиска с памучен тампон до спиране на кървенето.
4. Когато се появи синина на мястото на венепункция, се предписват топли компреси.
5. След вземане на кръв на пациента се разрешава да се върне към приема на лекарствата за отнемане.
6. Родителите на новороденото трябва да бъдат информирани, че може да се наложи вторичен анализ за проследяване на динамиката на анемията.

Предимства на теста на Кумбс

Такова изследване има някои предимства, а именно:

Минуси на анализа

Положителният тест на Coombs е доста трудоемък метод за изследване, предполагащ характерна точност на изпълнение. Когато се използва, човек може да срещне определени трудности, особено свързани с интерпретацията на слабо положителни влияния.

Установено е, че погрешни отрицателни или слабо положителни реакции при производството на проби на Coombs могат да бъдат последиците от незадоволително активно измиване на клетките, отслабване на антиглобулиновия реагент от серумни остатъци, както и съединения с немаслен вид, върху които антиглобулинът може да бъде фиксиран, губейки своята ефективност.

Тестът на Coombs има още един недостатък - ниската стабилност на антиглобулиновия реагент, чието придобиване и съхранение има индивидуални характеристики, което също затруднява числената оценка на ефекта на антиглобулиновия серум върху хемаглутинацията.

Болести, които могат да бъдат открити по време на изследването

Диагностиката на Coombs позволява да се открият определени видове заболявания, като:

• хемолитично неразположение на новородени;
• различни трансфузионни реакции;
• автоимунна хемолиза;
• лекарствена хемолитична анемия.

Към днешна дата тестът на Coombs се счита за доста популярна система за кръвен тест както при възрастен, така и при новородено. Това дава възможност за идентифициране на много различни заболявания.